Comparison of somatic cell counts and cycle threshold values in bovine milk samples with varying numbers of pathogens detected by real-time PCR
Vergleich von somatischen Zellgehalten und ct-Werten in bovinen Milchproben mit unterschiedlicher Anzahl durch real-time PCR nachgewiesener Erreger
Susanne Spittel
Klinik für Rinder
Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover
Bischofsholer Damm 15
D-30173 Hannover
Deutschland
susanne.spittel@gmx.de
In this field study, the results obtained with the commercial PathoProof™ Mastitis PCR Assay were analysed under consideration of the number of detected pathogens, the somatic cell count (SCC) and the PCR cycle threshold (ct) value. On four Northern German dairy farms, 681 quarter milk samples from 173 cows with clinically normal udders and secretions and with varying SCC in the preceding Dairy Herd Improvement (DHI) sampling were collected and subjected to PCR. PCR resulted in 70.6 % positive samples. The positive samples contained one (56.3 %), two (34.3 %) or three or more (9.4 %) pathogens. For the most frequently found pathogens Cory nebacterium (C.) bovis, coagulase-negative staphylococci (CNS), Streptococcus (S.) uberis, Staphylococcus (S.) aureus and Trueperella (T.) pyogenes/Peptoniphilus (P.) indolicus, samples were divided into monodetections, detections with another pathogen and detections with ≥2 further pathogens. Within those classes, means of the natural logarithm of the somatic cell count, mean ct-values and frequencies of samples >100 000 cells/ml were compared. For S. uberis, all parameters differed significantly between the pathogen classes, indicating that the two-species-limit from bacterial culture standards could be applied to PCR in order to differentiate between inflammation and contamination. For the other pathogens this could not be demonstrated.
In dieser Feldstudie wurden Ergebnisse des kommerziellen PathoProof™ Mastitis PCR Tests unter Berücksichtigung der Anzahl nachgewiesener Erreger, des soma tischen Zellgehaltes und des PCR-Schwellenwertes (ct-Wert) analysiert. In vier norddeutschen Milchviehherden wurden 681 Viertelanfangsgemelksproben von 173 Kühen mit klinisch gesunden Eutern und Sekreten, die unterschiedliche Zellgehalte in der letzten Milchleistungskontrolle hatten, gesammelt und mittels PCR untersucht. Die PCR erzielte 70.6 % positive Proben. Die positiven Proben enthielten einen (56.3 %), zwei (34.3 %) oder drei und mehr (9.4 %) Erreger. Für die am häufigsten nachgewiesenen Erreger Corynebacterium (C.) bovis, koagulase-negative Staphylokokken (KNS), Streptococcus (S.) uberis, Staphylococcus (S.) aureus und Truepe rella (T.) pyogenes/ Peptoniphilus (P.) indolicus, wurden die Proben in Monoinfektionen, Mischinfektionen mit einem weiteren Erreger und Nachweise mit ≥2 weiteren Erregern eingeteilt. Innerhalb dieser Klassen wurden Mittelwerte des natürlichen Logarithmus des somatischen Zellgehaltes, Mittelwerte der ct-Werte und die Häufig keit von Proben >100 000 Zellen/ml verglichen. Für S. uberis zeigten sich signi fikante Unterschiede bei allen Parametern, die darauf hinweisen, dass die zwei- Erreger-Grenze aus Standards der klassischen bakteriellen Untersuchung auch für die PCR angewendet werden kann, um zwischen Entzündung und Kontamination zu unterscheiden. Für die anderen Erreger konnte dieser Nachweis nicht erbracht werden.